Protocolo da Aula Prática de Extração de DNA

Extraindo DNA em sala de aula

Materiais (por grupo):
1)2 sacos plásticos grandes tipo "zip loc"
2)Uma banana média
3)Aparato filtrante: funil+ filtro para coar café
4)Álcool etílico (93-96° g.l.)
5)Dois copos de vidro de aproximadamente 300ml
6)Palito de madeira (tipo churrasco ou manicure)
7)12 colheres de sopa (50ml) de detergente neutro (sem corantes)
8)2 colheres de sobremesa (15g) de sal de cozinha
9)300ml de água destilada*
10)Dois tubos Falcon grandes*

Materiais comuns:
1)Gelo*
2)Banho Maria*
Atenção: Materiais marcados com asterisco (*) serão fornecidos aos alunos

Método:
1)Prepare a solução de extração de DNA:
a.12 colheres de sopa (50ml) de detergente neutro (sem corantes)
b.2 colheres de sobremesa (15g) de sal de cozinha
c.300ml de água destilada*
2)Coloque 1/2 banana em um saco zip loc
3)Esmague-a com o punho por no mínimo 2 minutos
4)Adicione pequena parte da solução de extração ao conteúdo do saco
5)Misture tudo, apertando com as mãos, por 1 minuto
6)Transfira a mistura para o copo
7)Adicione o restante da solução ao conteúdo do copo e misture tudo com o palito
8)Coloque o copo em banho-maria por 2 minutos a 60°C
9)Derrame o extrato obtido no aparato filtrante e deixe filtrar 15 ml no tubo Falcon
10)Coloque o tubo em um recipiente com gelo
11)Derrame o álcool gelado no tubo, deixando escorrer vagarosamente pela borda. até que o mesmo esteja cheio pela metade. Formam-se duas fases: a superior, alcoólica e a inferior, aquosa
12)Agite os tubos até formarem-se filamentos

Questões:
1)Quais os resultados?
2)Quais as três etapas fundamentais da extração de DNA de células eucariontes?
3)O que acontece quando coloca-se...
a.O detergente?
b.O sal?
c.O etanol?